文章摘要:目的：通过观察补阳还五汤调节SIRT1/p53通路发挥对糖尿病周围神经病变（DPN）大鼠的神经保护作用，探讨其治疗DPN的机制和方中黄芪用量。方法：90只SD大鼠随机分为正常组，DPN组，DPN加含120 g黄芪的补阳还五汤组（DPN+BYHW120组），DPN加含60 g黄芪的补阳还五汤组（DPN+BYHW60组），DPN加含30 g黄芪的补阳还五汤组（DPN+BYHW30组），DPN加α-硫辛酸组（DPN+ALA组）。除正常组外，其余各组大鼠均用高糖高脂饲料和腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病。各用药干预组分别给与相应药物持续干预12周，剂量依次为含120 g黄芪的补阳还五汤15 g·kg^-1·d^-1，含60 g黄芪的补阳还五汤8.75 g·kg^-1·d^-1，含30 g黄芪的补阳还五汤 5.625 g·kg^-1·d^-1；α-硫辛酸 60 mg·kg^-1·d^-1。正常组给与标准饮食。干预结束后检测机械性痛阈和神经传导速度；取L4-5背根神经节，苏木素-伊红（HE）染色、甲苯胺蓝染色观察病理形态改变，末端脱氧核苷酸转移酶dUTP生物素缺口末端标记（TUNEL）染色观察神经细胞凋亡情况；免疫组化和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测剪切的半胱天冬氨酸蛋白水解酶-3（cleaved Caspase-3），SIRT1/p53通路中主要蛋白：沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1），乙酰化的p53（acetyl-p53），线粒体相关动力蛋白1（Drp1），B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达。结果：与正常组比较，DPN组血糖升高（P<0.01），神经传导速度、机械性痛阈均降低（P<0.01），TUNEL染色阳性细胞百分比、cleaved Caspase-3表达升高（P<0.01），SIRT1表达降低（P<0.01），acetyl-p53，Drp1，Bax/Bcl-2均升高（P<0.01）。与DPN组比较，各用药干预组cleaved Caspase-3，acetyl-p53，Drp1，Bax/Bcl-2均降低（P<0.01）；除DPN+BYHW30组外，其余用药干预组神经传导速度、机械性痛阈升高（P<0.05，P<0.01），TUNEL染色阳性细胞百分比升高（P<0.05，P<0.01）；DPN+BYHW120组，DPN+ALA组SIRT1表达升高（P<0.05，P<0.01）。与DPN+BYHW120组比较，DPN+BYHW60组，DPN+BYHW30组的感觉神经传导速度、机械性痛阈、SIRT1表达降低（P<0.05，P<0.01），cleaved Caspase-3表达升高（P<0.01）；DPN+BYHW30组TUNEL染色阳性细胞百分比、acetyl-p53表达升高（P<0.01）。结论：补阳还五汤通过调节SIRT1/p53抑制细胞凋亡，治疗DPN。其治疗作用与与方中黄芪的用量有一定关系，120 g黄芪剂量的补阳还五汤抑制p53依赖的细胞凋亡的作用较60 g和30 g黄芪剂量补阳还五汤更明显。

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